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03-192026

兩種細(xì)菌對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦免疫和DNA甲基化相關(guān)基因表達(dá)的影響

汪麗婷1,2黃建華1,3周發(fā)林1,3李運(yùn)東1,3姜松1,3楊其彬1,3江世貴1史健志1,3丁陽陽1,3楊麗詩1,3

1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室2.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院3.三亞熱帶水產(chǎn)研究院

摘要：明確斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon)應(yīng)對(duì)細(xì)菌感染的免疫應(yīng)答機(jī)制及其表觀遺傳調(diào)控特征，可為病害防控策略提供重要理論支持。本研究通過體內(nèi)注射革蘭氏陰性菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、革蘭氏陽性菌糞腸球菌(Enterococcus faecalis)和磷酸鹽緩沖液(PBS)，探討了兩種細(xì)菌對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦組織學(xué)、免疫能力和DNA甲基化水平的影響。采用肝胰腺和鰓組織切片觀察及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)進(jìn)行分析。蘇木精-伊紅(HE)染色結(jié)果顯示，副溶血弧菌感染后，斑節(jié)對(duì)蝦肝胰腺小管上皮細(xì)胞脫落，同時(shí)鰓絲收縮；注射糞腸球菌后，肝胰腺小管細(xì)胞出現(xiàn)壞死，鰓組織多發(fā)生水腫、出血現(xiàn)象。qRT-PCR結(jié)果表明，兩種細(xì)菌刺激后均能顯著上調(diào)抗菌肽基因(Crustin)和熱休克蛋白70基因(Hsp70)的表達(dá)；且脂多糖-β-1, 3-葡聚糖結(jié)合蛋白基因(LGBP)在鰓組織中顯著上調(diào)，脂肪酸結(jié)合蛋白基因(Fabp)在肝胰腺組織中顯著上調(diào)。感染兩種細(xì)菌均能顯著上調(diào)肝胰腺和鰓組織中的甲基化CpG結(jié)合蛋白2基因(MBD2)、泛素樣含植物同源結(jié)構(gòu)域和環(huán)指結(jié)構(gòu)域1基因(UHRF1)和DNA甲基轉(zhuǎn)移酶2基因(DNMT2)的表達(dá)水平，但副溶血弧菌的刺激效果更明顯。研究表明，斑節(jié)對(duì)蝦的免疫基因及DNA甲基化相關(guān)基因在副溶血弧菌和致病性糞腸球菌的侵染下均顯著上調(diào)表達(dá)，證實(shí)這些基因通過調(diào)控宿主生理功能在抗感染防御中發(fā)揮關(guān)鍵作用。還原

關(guān)鍵詞：

斑節(jié)對(duì)蝦;副溶血弧菌;糞腸球菌;組織學(xué)切片;免疫相關(guān)基因;DNA甲基化相關(guān)基因;

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